Selectarea poliformală a mutațiilor punctelor de control imun în autoimunitatea tiroidiană

Potrivit nature.com, acest articol oferă o versiune needitată a manuscrisului pentru a oferi acces timpuriu la descoperirile sale. Înainte de publicarea finală, manuscrisul va fi supus unor editări suplimentare.

👉 Rolul punctelor de control imunitar și implicațiile mutațiilor somatice

Sistemul nostru imunitar conține multiple puncte de control care previn activarea limfocitelor autoreactive. Cum unele limfocite scapă acestor restricții pentru a cauza boli autoimune rămâne prost înțeles. O ipoteză veche susține că mutațiile somatice în genele reglatorii imunitare pot permite limfocitelor autoreactive să ocolească punctele de control ale toleranței, dar testarea acesteia a fost provocatoare din cauza limitărilor tehnice.

Aici, folosim secvențierea exomului complet și NanoSeq, un protocol precis de secvențiere a ADN-ului la nivel de moleculă unică, pentru a căuta în mod cuprinzător mutațiile de conducere în boala tiroidiană autoimună. Aceasta a relevat numeroase clone de celule B care dobândesc convergent mutații de pierdere a funcției în genele cheie ale punctului de control imunitar TNFRSF14 (HVEM) și CD274 (PD-L1), precum și mutații mai puțin frecvente în alte gene imune.

👉 Identificarea și caracterizarea clonelor mutate în biopsii cu inflamație severă

În biopsiile cu inflamație severă, am detectat zeci până la sute de clone mutant independente ale punctului de control imun. Microdisecția cu laser, secvențierea metilației, transcriptomica spațială, imunomarcarea, secvențierea ADN-ului la nivel de nucleu unic și sinteza anticorpilor au localizat aceste mutații la celulele B, au confirmat că unele sunt autoreactive și au identificat clone care poartă multiple hituri. Am descoperit pierdere bialelică extinsă a genei TNFRSF14 și clone cu până la 4-6 mutații de conducere. Deși fiecare clonă reprezintă o mică fracțiune din celule (de obicei <1%), numeroasele clone mutante din fiecare donator constituie o fracțiune semnificativă de celule B care au mutații de conducere.

Rezultatele noastre sprijină ipoteza că mutațiile somatice în limfocitele autoimune pot permite acestora să scape de constrângerile toleranței printr-o cascadă poliformală de evoluție somatică, oferind noi perspective asupra bazei moleculare a bolii autoimune.